厦门代生的花费 维生素C含量测定方法-比色法

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常规测定抗坏血酸的方法是采用

2，6-二氯酚靛酚滴定法，但因某些叶片中花青素量较高，当用酸提取时呈红色，因而无法滴定。本试验采用二甲苯萃取比色法，则不受花青素的干扰。关于滴定法可以参考《

维生素

C含量测定方法-滴定法

》。

1.原理

向一定量提取液中加人过量的2，6-二氯酚靛酚染料溶液与维生素c作用后，多余染料用二甲苯萃取比色。待测液中抗坏血酸的含量与二甲苯萃取的颜色呈线性负相关，即待测液中抗坏血酸含量越多，未被还原的染料就越少，二甲苯萃取的颜色也就越浅。由于水溶性的花青素不溶于二甲苯，因而不影响测定结果。

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2.材料、仪器设备及试剂

⑴材料

新鲜甘蓝叶片、白萝卜等。

⑵仪器设备

722型分光光度计，容量瓶,研钵，不锈钢刀，具塞大试管。

⑶试剂

①1%草酸。

②2%草酸。

③30%硫酸锌。

④15%亚铁氰化钾。

⑤染料溶液：称取100 mg2，6-二氣酚靛酚和82 mg碳酸氢钠溶于约60mL热水中，过滤定容至100mL容量瓶中，倒入棕色试剂瓶存放于冰箱内。使用时稀释4倍，此溶液每毫升约相当于0.1 mg

的维生素

C。

⑥抗坏血酸标准溶液：精确称取100 mg分析纯抗坏血酸，溶于1%草酸，定容至100 mL，再从中吸取5 mL，用1%草酸再稀释至100 mL，稀释后每毫升含抗坏血酸0.05mg(标准溶液在使用前临时配制。

⑦二甲苯：分析纯(本法使用过的二甲苯可用20% NaOH中和后，

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)。

3.实验步骤

(1)标准曲线

取具塞大试管6个.分别吸取抗坏血酸标准溶液0mL、1mL、2mL、2.5mL、3mL、4mL，用1%草酸补充至4mL。各管中抗坏血酸含量相应为0、0.05mg、0.10 mg、0.125 mg 、0.15 mg、0.20mg。各管中加入染料溶液2 mL，随即加入二甲苯5 mL,迅速摇动约0.5 min，静置后二甲苯与水层分离，将上层二甲苯萃取液轻轻倒入lcm比色杯，在500nm波长下测定吸光度。以二甲苯作空白调零，求得标准系列抗坏血酸毫克数与相应的吸光度值的四归方程。

(2)样品提取

取新鲜蔬菜洗净,擦干,在玻板上用不锈钢刀切碎混匀。称取2g样品放至研钵中,加入3mL2%草酸研磨至匀浆，然后将匀浆倒至100mL容量瓶中,残渣用1%草酸冲洗,洗液一并倒至容量瓶中,加人1mL 30%硫酸锌,摇动容量瓶,再加人1mL15%亚铁氰化钾,以除去脂溶性色素,再用1%草酸定容至刻度，摇匀后过滤到干净小烧杯中。

(3)测定

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取上述提取液4mL(若抗坏血酸含量高,叮适当减少取量,不足4mL的可用1%草酸补足至 ml.)至具塞大试管中,依次加入染料2mL、二甲苯5 mL,按照标准曲线的方法测定吸光度。

4.计算

式中：X为4mL提取液中含抗坏血酸的毫克数；Vt

为提取液总体积，

mL；W为样品鲜重，g； Vm

为测定用体积量，

mL。

以上就是我们对维生素C含量测定方法-比色法的整合，更多相关检测，请联系我们。

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